骨、软骨、关节疾病常见动物模子(2)

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是坚硬而有必然韧性的结缔组织,由大量钙化的细胞间量及数种细胞构成。钙化的细胞间量称为骨基量。

细胞有骨原细胞、成骨细胞、骨细胞及破骨细胞四种。骨细胞最多,位于骨基量内,其余三种细胞均位于骨组织的边沿。

由软骨组织及四周的软骨膜构成。软骨是固定的结缔组织,富有弹性,能承担压力和耐摩擦,有必然撑持和庇护感化。软骨仅散布于关节面、椎间盘、某些骨毗连部位、唤吸道及耳郭等处。

软骨组织由软骨细胞、基量及纤维构成。根据软骨组织所含纤维的差别,可将软骨分为通明软骨、纤维软骨和弹性软骨三种。

分可动和可不动两大类型。可动关节的构造比力复杂,由关节软骨、关节囊和滑液等构成。

骨量松散即骨量松散症,是多种原因引起的一组骨病,骨组织有一般的钙化,钙盐与基量呈一般比例,以单元体积内骨组织量削减为特征的代谢性骨病变。

骨量松散症可发作于差别性别和任何年龄,但多见于绝经后女性和老年男性。以骨骼痛苦悲伤、易于骨折为特征。临床表示为痛苦悲伤,以腰背痛多为常见;身长缩短、驼背;骨折及唤吸功用下降。

跟着社会的老龄化,其严峻危害中老年人身体安康。骨量松散发病机造复杂,内排泄紊乱(如性激素排泄削减)是其发病的次要原因。但目前对其发病过程的诸多环节仍不清晰,因而在治疗方面也难以获得打破性的停顿。

切除卵巢的动物雌激素程度下降而引起的骨量松散,其发病过程与人类女性绝经后骨量丧失附近(往势模子);糖皮量激素可引起机体的钙磷代谢改变而诱发骨量松散(糖皮量激素模子)。

1、卵巢切除模子:雌性大鼠,用戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醒,术区剃毛,手术进路有两种。其一是背侧进路:在大鼠髂嵴顶部外上方1cm摆布,腰椎骶棘肌两侧做纵行暗语,长约0.5cm,翻开后腹膜。卵巢是呈深粉色红色颗粒状组织。多被其四周脂肪组织多掩盖,提起后丝线结扎其四周相连组织,将其切除。其二是腹侧进路:往下腹部正中暗语,开大腹腔,切除卵巢。

术后8-12周即可胜利诱导动物的骨量松散构成,表示为单光子骨密度仪和双能X线骨密度仪测定其股骨和全身的骨密度降低,游标卡尺测定股骨骨皮量变薄,力学检测股骨、胫骨抗弯强度降低及脆性增加。本模子用于研究绝经后骨量松散发病机造、治疗及相关问题。也可选用小鼠及兔成立此模子。

2、糖皮量激素法:选用安康雌性大鼠,3-10月龄,在臀肌或后腿肌肉打针地塞米松(1-2.5mg/kg),每周2次,6-8周后,即可复造出糖皮量激素性骨量松散模子,表示同往势大鼠模子。

在临床上糖皮量激素引起的骨量酥松病人其实不少见,本模子用于研究此类疾病的发病机造,病理改动及预防办法。此模子可由低钙饮食而加速诱发,利用维生素D3可阻遏其构成。此外动物年龄不宜过大,以肃清年龄因素对骨量改变的影响。

骨是乳腺癌等恶性肿瘤常见的远转移部位。乳腺癌骨转移模子的成立次要摘用接种办法,即用动物某人类乳腺癌细胞株,通过原位或异位种植产生的动物模子。部门模子用于模仿人类骨转移的骨量毁坏外,还可模仿痛苦悲伤引起的神经化学功用紊乱及行为学特征,同时可做为痛苦悲伤模子利用。

1、裸鼠模子:肿瘤细胞摘用MDA-MB231或MDA-MB-435细胞,造模前用PBS调剂成浓度为1×107个/ml的细胞悬液。动物摘用雌性Balb/c nu/nu裸鼠。将裸鼠麻醒后,用19G的针头间接于骨性粗隆上刺彻骨皮量,然后将针尖插进骨干内注进0.1 ml细胞悬液,可将对侧注进同量的心理盐水做为比照。约在接种后第2周可在髓腔中发现肿瘤细胞,于第3周所有的动物髓腔均有肿瘤组织,于第4周发现有骨皮量及四周软组织的浸润。

2、大鼠模子:造模摘用大鼠乳腺癌MRMT-1细胞,完成传代培育提拔后,在造模前设置装备摆设成浓度1×106个/ml的细胞悬液,置于冰上备用。动物选用雌性SD大鼠,体重150-200g。动物麻醒后腹部朝上,左侧后肢剪毛,皮肤消毒,在胫骨上段皮肤剪开1cm小口,以膝关节以下约5mm处的胫骨粗隆起内侧面用21G或22G针头穿刺打孔,针头穿彻骨皮量进进骨髓腔后,用微量打针器将3μl设置装备摆设好的癌细胞悬液,打针于大鼠骨髓腔内,撤出微量打针器后敏捷用骨蜡密封针孔,以防癌细胞悬液从骨髓腔中溢出。然后以无菌棉签蘸心理盐水清洗创口,皮肤缝合。

接种10-14天,X线影像展现,骨皮量和骨小梁受损,20天后呈现明显的骨量毁坏,严峻的可能呈现病理性骨折。跟着肿瘤的生长,大鼠活动性逐步降低,12-14天后表示出具备机械性痛觉超敏、机械性痛觉过敏和热痛觉过敏等特征。

造模办法相对简单、周期短、成本低、成瘤率高、生长速度相对一致、转移部位明白。一般不会因肿瘤转移至其他脏器对尝试成果产生影响。

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