在一般培育提拔细胞的情状下，我们时常会发现细胞呈现一些小黑点，有些小黑点跟着细胞数量的增长而增长，有一些则不会，那么那些小黑点到底是什么？会影响细胞增长吗？
| 细胞培育提拔中呈现的小黑点能够分为以下几类：
1. 细胞碎片
在细胞培育提拔中不适宜操做引起的化学或物理上的刺激，例如胰酶消化时间过长，会招致细胞灭亡，从而产生良多碎片。
2. 凋亡小体
在体外培育提拔前提下，细胞很随便遭到情况改动的影响，诱发细胞的凋亡，产生凋亡小体。
3. 血清中的沉淀
颠末热处置的血清中，做为常见沉淀物量的磷酸钙会显著增加，且因为布朗运动会看上往能够活动。
4. 收原体污染
因为收原体的污染，招致呈现的小黑点，明显影响细胞增长。
| 细胞培育提拔过程中若何制止产生小黑点？
悬浮细胞：
搜集细胞上清慢速离心（500~600 rpm/min，5~6 min）并改换新的培育提拔瓶。
贴壁细胞：
将细胞用 PBS 洗 2~3 遍，洗的时候，悄悄拍打培育提拔瓶，让贴壁不牢的碎片和颗粒脱落，再弃往 PBS，消化时先加低浓度的胰酶如 0.05% 胰酶消化 1 min 摆布，让细胞间隙中的颗粒和碎片脱落下来，往掉低浓度胰酶，然后一般消化细胞，将搜集的细胞悬液慢速离心（500~600 rpm/min，5~6 min）并改换新的培育提拔瓶，并能够测验考试恰当增加血清浓度停止培育提拔。
假设思疑黑点是收原体污染，可停止收原体检测，检测阳性请及时将细胞处置后丢弃。比力贵重的细胞，能够测验考试利用收原体肃清剂（Hycyte™收必清收原体肃清试剂盒）往除，并与其他细胞分隔培育提拔。
| 重视事项：
1. 掌握细胞传代的更佳时机，不要细胞长老了再传代；
2. 掌握好消化时间，避免消化过度产生细胞碎片；
3. 削减血清等试剂的冻融次数；
4. 将培育提拔液的 PH 调到更佳；
5. 严厉掌握水量和器皿的清洁。
做者：海星生物
公家号：海星生物科技 / 苏州海星生物
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